針對目前國內(nèi)紅掌和鳳梨種苗主要依賴進口的現(xiàn)實問題，本文就引進市場上熱銷的頗有潛力的紅掌和觀賞鳳梨品種，采用現(xiàn)代植物組織培養(yǎng)技術(shù)和溫室大棚栽培技術(shù)，研究開發(fā)和推廣質(zhì)優(yōu)價廉的組培苗，希望對國內(nèi)同行有一定的參考價值。
一、引進名優(yōu)品種
在國內(nèi)外市場上暢銷的名優(yōu)品種，如亞利桑娜、熱情、情人紅、粉冠軍等紅掌，以及吉利紅星、丹尼斯等鳳梨。引進的主要形式是母株外殖體。
二、無菌系建立和維持
根據(jù)課題設計的技術(shù)路線，一方面從植株采取幼嫩莖段或芽段，進行常規(guī)消毒后，接種到培養(yǎng)基上；另一方面，采取幼嫩葉片，進行常規(guī)消毒后，接種到誘導培養(yǎng)基上。
莖段或芽段的消毒方法：取嫩的莖段或芽段在自來水中沖洗10分鐘，放進無菌水中浸泡30秒鐘，用0.1%滅菌消毒15秒鐘，用無菌水沖洗2次后放進70%酒精泡30秒鐘，再用0.1%的升汞浸泡20分鐘，最后用無菌水沖洗3次，可以在超凈臺上進行接種。
葉片消毒方法：取嫩葉用70%的酒精擦拭表面，接著在無菌水中洗2分鐘，把葉片切成1平方厘米，放進加有1～2滴吐溫80的1%NaOCI溶液浸泡30秒，放在超凈臺上用無菌水；中洗3～4次，就可以接種。
結(jié)果表明，在莖段培養(yǎng)方面沒有取得突破性進展，主要問題在于不能徹底消毒。若消毒時間不夠，接種材料很快污染；消毒時間過長，則往往會將材料殺死；有時候，一些材料在初代接種時既沒有污染，也沒有死亡，但往往在轉(zhuǎn)瓶繼代培養(yǎng)時又出現(xiàn)污染。這種污染往往是由內(nèi)生細菌污染引起。
葉片培養(yǎng)途徑的成功率高，可達80～90%以上。但是，這種方法所需要的時間也較長，葉片培養(yǎng)完成脫分化和再分化的時間少則半年，多則一年以上；而且，葉片培養(yǎng)對培養(yǎng)基的要求也較為苛刻，期間需要不斷調(diào)整培養(yǎng)基。篩選出一些主要品種葉片培養(yǎng)途徑所需的培養(yǎng)基配方，成功地獲得了無菌種芽。
三、工廠化生產(chǎn)紅掌和鳳梨組培苗
經(jīng)過多次試驗，最終篩選出適合的增殖和生根培養(yǎng)基（表2），紅掌繼代培養(yǎng)的時間為40～45天，鳳梨繼代培養(yǎng)的時間為50～60天，具體還需要觀察增殖芽的長勢情況；培養(yǎng)的條件為溫度為25～30℃，光照強度為1500～2500LUX，每天人工光照14～16小時；接種時除了控制降低污染率外，還要注意到在切割時鳳梨的生長點較低，不要切掉生長點，同時要去掉老的愈傷組織。
從培養(yǎng)基的篩選、培養(yǎng)條件的控制、切割方法的試驗，使增殖率MR值為2.5（紅掌）和3.0（丹尼斯鳳梨），生根率達到98%以上。實現(xiàn)了工廠化生產(chǎn)，建立起工廠化快繁體系。依托該體系，可以使1瓶無菌種芽在10個月時間內(nèi)擴增到1000瓶以上。
在組培過程中，必須注意控制種芽的增殖代數(shù)，通常在18代以下，這樣既可以保證質(zhì)量和數(shù)量要求，也為后續(xù)種芽的開發(fā)提供了充裕的時間。同時，為保證種芽質(zhì)量，降低污染率項目組還配備有專門的質(zhì)檢人員加強管理，從水質(zhì)的檢測、培養(yǎng)基配制、人工切割、環(huán)境條件的控制一直到培養(yǎng)空間的消毒均采取一系列有效的措施，及時發(fā)現(xiàn)和處理不正常的種芽，如玻璃苗、花葉、皺葉等。
四、組培苗的培育和馴化
當組培苗在培養(yǎng)瓶中生長成為完整的植株后，經(jīng)過一段時期的煉苗，則需要將瓶苗取出來，清洗干凈，消毒，移栽到栽培基質(zhì)中，再經(jīng)過一段時期的培育，達到一定的規(guī)格以后，方可作為成品種苗銷售。
在組培苗的培育和馴化的各個階段，應制訂嚴格的操作規(guī)程，由花棚專門的栽培技術(shù)人員執(zhí)行。首先組培苗出瓶時要嚴格地消毒，方法是將健壯無污染的組培苗小心取出用清水洗）爭殘余的培養(yǎng)基，放入1000倍50%的多菌靈溶液中浸30秒后即可；栽培用的基質(zhì)是由泥炭、珍珠巖和椰糠等按照一定的比例調(diào)配而成，經(jīng)過消毒處理后備用；紅掌組培苗的移基質(zhì)為泥炭土∶珍珠巖=6∶1，鳳梨組培苗移栽基質(zhì)為泥炭：珍珠巖∶椰糠=4∶1∶3；培養(yǎng)的條件是溫度控制在自天25～30℃，夜晚20～25℃，濕度60～80%，光線強度在8000～15000LUX為佳，溫度低于。15℃或高于33℃時容易受到傷害（紅掌組培苗比鳳梨組培苗更容易受到傷害）；因組培苗比較嬌嫩易受病菌的感染，移栽的環(huán)境和所用的工具、用具都必須清洗干凈，經(jīng)過高錳酸鉀溶液漂洗消毒以后方可使用。結(jié)果表明，紅掌和鳳梨組培苗的移栽成活率達到98%以上，組培苗3～4厘米經(jīng)過50～60天的培養(yǎng)即可以達到出貨的標準。
一、引進名優(yōu)品種
在國內(nèi)外市場上暢銷的名優(yōu)品種，如亞利桑娜、熱情、情人紅、粉冠軍等紅掌，以及吉利紅星、丹尼斯等鳳梨。引進的主要形式是母株外殖體。
二、無菌系建立和維持
根據(jù)課題設計的技術(shù)路線，一方面從植株采取幼嫩莖段或芽段，進行常規(guī)消毒后，接種到培養(yǎng)基上；另一方面，采取幼嫩葉片，進行常規(guī)消毒后，接種到誘導培養(yǎng)基上。
莖段或芽段的消毒方法：取嫩的莖段或芽段在自來水中沖洗10分鐘，放進無菌水中浸泡30秒鐘，用0.1%滅菌消毒15秒鐘，用無菌水沖洗2次后放進70%酒精泡30秒鐘，再用0.1%的升汞浸泡20分鐘，最后用無菌水沖洗3次，可以在超凈臺上進行接種。
葉片消毒方法：取嫩葉用70%的酒精擦拭表面，接著在無菌水中洗2分鐘，把葉片切成1平方厘米，放進加有1～2滴吐溫80的1%NaOCI溶液浸泡30秒，放在超凈臺上用無菌水；中洗3～4次，就可以接種。
結(jié)果表明，在莖段培養(yǎng)方面沒有取得突破性進展，主要問題在于不能徹底消毒。若消毒時間不夠，接種材料很快污染；消毒時間過長，則往往會將材料殺死；有時候，一些材料在初代接種時既沒有污染，也沒有死亡，但往往在轉(zhuǎn)瓶繼代培養(yǎng)時又出現(xiàn)污染。這種污染往往是由內(nèi)生細菌污染引起。
葉片培養(yǎng)途徑的成功率高，可達80～90%以上。但是，這種方法所需要的時間也較長，葉片培養(yǎng)完成脫分化和再分化的時間少則半年，多則一年以上；而且，葉片培養(yǎng)對培養(yǎng)基的要求也較為苛刻，期間需要不斷調(diào)整培養(yǎng)基。篩選出一些主要品種葉片培養(yǎng)途徑所需的培養(yǎng)基配方，成功地獲得了無菌種芽。
三、工廠化生產(chǎn)紅掌和鳳梨組培苗
經(jīng)過多次試驗，最終篩選出適合的增殖和生根培養(yǎng)基（表2），紅掌繼代培養(yǎng)的時間為40～45天，鳳梨繼代培養(yǎng)的時間為50～60天，具體還需要觀察增殖芽的長勢情況；培養(yǎng)的條件為溫度為25～30℃，光照強度為1500～2500LUX，每天人工光照14～16小時；接種時除了控制降低污染率外，還要注意到在切割時鳳梨的生長點較低，不要切掉生長點，同時要去掉老的愈傷組織。
從培養(yǎng)基的篩選、培養(yǎng)條件的控制、切割方法的試驗，使增殖率MR值為2.5（紅掌）和3.0（丹尼斯鳳梨），生根率達到98%以上。實現(xiàn)了工廠化生產(chǎn)，建立起工廠化快繁體系。依托該體系，可以使1瓶無菌種芽在10個月時間內(nèi)擴增到1000瓶以上。
在組培過程中，必須注意控制種芽的增殖代數(shù)，通常在18代以下，這樣既可以保證質(zhì)量和數(shù)量要求，也為后續(xù)種芽的開發(fā)提供了充裕的時間。同時，為保證種芽質(zhì)量，降低污染率項目組還配備有專門的質(zhì)檢人員加強管理，從水質(zhì)的檢測、培養(yǎng)基配制、人工切割、環(huán)境條件的控制一直到培養(yǎng)空間的消毒均采取一系列有效的措施，及時發(fā)現(xiàn)和處理不正常的種芽，如玻璃苗、花葉、皺葉等。
四、組培苗的培育和馴化
當組培苗在培養(yǎng)瓶中生長成為完整的植株后，經(jīng)過一段時期的煉苗，則需要將瓶苗取出來，清洗干凈，消毒，移栽到栽培基質(zhì)中，再經(jīng)過一段時期的培育，達到一定的規(guī)格以后，方可作為成品種苗銷售。
在組培苗的培育和馴化的各個階段，應制訂嚴格的操作規(guī)程，由花棚專門的栽培技術(shù)人員執(zhí)行。首先組培苗出瓶時要嚴格地消毒，方法是將健壯無污染的組培苗小心取出用清水洗）爭殘余的培養(yǎng)基，放入1000倍50%的多菌靈溶液中浸30秒后即可；栽培用的基質(zhì)是由泥炭、珍珠巖和椰糠等按照一定的比例調(diào)配而成，經(jīng)過消毒處理后備用；紅掌組培苗的移基質(zhì)為泥炭土∶珍珠巖=6∶1，鳳梨組培苗移栽基質(zhì)為泥炭：珍珠巖∶椰糠=4∶1∶3；培養(yǎng)的條件是溫度控制在自天25～30℃，夜晚20～25℃，濕度60～80%，光線強度在8000～15000LUX為佳，溫度低于。15℃或高于33℃時容易受到傷害（紅掌組培苗比鳳梨組培苗更容易受到傷害）；因組培苗比較嬌嫩易受病菌的感染，移栽的環(huán)境和所用的工具、用具都必須清洗干凈，經(jīng)過高錳酸鉀溶液漂洗消毒以后方可使用。結(jié)果表明，紅掌和鳳梨組培苗的移栽成活率達到98%以上，組培苗3～4厘米經(jīng)過50～60天的培養(yǎng)即可以達到出貨的標準。
